Question

W jaki sposób wytrącic DNA z owocu kiwi? plis potrzebuje na teraz!

Answer 1

Wytrącanie DNA z owocu kiwi metodą domową:

Przygotować:

100 ml wody 1 łyżeczka soli kuchennej (NaCl) 1 łyżeczka soku z  kiwi 1 łyżeczka płynu do mycia naczyń denaturat (schłodzony) mikser lejek i papierowy filtr do kawy lód warzywo/owoc do izolacji DNA (polecamy cebule i jabłka)

Wykonanie doświadczenia:

przygotowujemy roztwór lizujący – mieszamy: 100 ml wody, 1 łyżeczkę soli do peklowania mięsa (lub 1 łyżeczkę soli kuchennej i 1 łyżeczkę soku z kiwi) oraz 1 łyżeczkę płynu do mycia naczyń

Owoc rozdrabniamy mikserem

łączymy 50 ml roztworu lizującego z 3 łyżeczkami uzyskanej papki owocowej i dokładnie mieszamy

uzyskany roztwór ogrzewamy przez 20 min. w łaźni wodnej (60-65 st. C)

roztwór chłodzimy przez 10-15 min. w lodzie (słoik wkładamy do naczynia z lodem)

do czystego naczynia filtrujemy schłodzony roztwór przez filtr do kawy włożony do lejka

do przefiltrowanego roztworu dodajemy ostrożnie 2 objętości zimnego denaturatu i wstawiamy do zamrażarki na 15 minut w efekcie końcowym uzyskujemy DNA w postaci biało-przezroczystego gluta

Wnioski końcowe:

Pierwszy etap całego procesu ma na celu mechaniczne rozdrobnienie tkanki roślinnej. Roztwór lizujący razem z podwyższoną temperaturą powodują rozrywanie błon komórkowych otaczających komórki (obecność detergentu w płynie do mycia naczyń) i wydostanie się DNA jądrowego do roztworu. Obecne w roztworze proteazy (papaina – sól do peklowania mięsa, aktynidyna – sok z kiwi,) częściowo trawią białka obecne w komórkach roślinnych, przyczyniając się do zwiększenia czystości naszego DNA. Filtrowanie ma na celu usunięcie z roztworu niepotrzebnych resztek roślinnych. Dodanie denaturatu prowadzi do wytrącenia DNA, które jest rozpuszczone w roztworze (niska temperatura zwiększa efektywność tego procesu).