Question

Si se omite un paso específico en la tinción Gram, todavía podría diferenciarse entre las bacterias Gram-positivas y las bacterias Gram-negativas.

Answer 1

Los procedimientos de tinción de Gram  inician con la aplicación de un colorante básico, violeta de genciana. A continuación se aplica una solución de yodo; todas las bacterias se tiñen de color azul en este punto del procedimiento. Luego la célula se trata con alcohol. Las células grampositivas que conservan el complejo de violeta de genciana-yodo adquieren un color azul y las células gramnegativas se decoloran por completo con la adición de alcohol. Como último paso se aplica otro colorante (como rojo de safranina) de forma que las células gram negativas decoloradas adquieran un color contrastante; las células grampositivas adquieren un color violáceo

La tinción de Gram depende de la capacidad de ciertas bacterias (grampositivas) para retener un, complejo de cristales de color violeta (un colorante de color violáceo) además de yodo después de un breve lavado con alcohol o acetona. Las bacterias gramnegativas no retienen el complejo de colorante-yodo y se vuelven translúcidas, pero pueden volverse a teñir con safranina (un colorante de color rojo). Así, las bacterias grampositivas adquieren un aspecto violáceo bajo el microscopio, en tanto que las bacterias gramnegativas se ven de color rojo. La diferenciación entre estos dos grupos refleja diferencias fundamentales en sus envolturas celulares. 

En conclusión, puedes omitir el último paso, el de agregar safranina, ya que ya de por sí las bacterias gram negativo las vas a observar transparentes, la safranina solamente la utilizas para que te sea más fácil diferenciarlas (y más para un ojo inexperto) pero una persona experta y con años de experiencia, puede saltarse ese paso.